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- note: La voce mi sembra abbastanza esauriente; mancano le fonti ma rimediarle non dovrebbe essere troppo complicato. Non so se sia o meno una buona idea affiancare al paragrafo sulle tecniche un altro -riassuntivo- sui concetti fondamentali, ma forse finirebbe solo per appesantire la pagina... --Sogeking un, deux, trois... 16:39, 6 apr 2007 (CEST)
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[modifica] Mispairing PCR
La mispairing PCR consente, insieme ad altre applicazioni, di creare siti di restrizione per particolari enzimi, laddove non fossero presenti naturalmente, con l’uso di primers contenenti una o due basi non complementari alla reale sequenza da amplificare. La condizione necessaria per l’appaiamento fra primer e stampo è che, oltre alla serie di basi in 5’ a monte delle basi che non si appaiano, almeno le ultime 2 delle basi in 3’ del primer siano complementari allo stampo. Ciò può essere sfruttato per individuare delle mutazioni disegnando mispairing primers la cui estremità in 3’ si appai appena a monte della base da verificare, e che creino un sito di restrizione solo nel caso in cui, nella posizione da verificare, sia presente la base mutata o alternativamente quella wild type
