DNA提取
维基百科，自由的百科全书
目录 |
[编辑] DNA提取概述
DNA提取分爲三個基本步驟，每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。
- 利用研磨或者超聲破碎細胞，並通過加入去污劑以除掉膜脂。
- 加入蛋白酶，醋酸鹽沉澱，或者酚/氯仿抽提，以除掉細胞内的蛋白，如與DNA結合的組蛋白。
- 將DNA在冷乙醇或異丙醇中沉澱，因爲DNA在醇中不可溶而黏在一起，這一步也能除掉鹽分。
另外，目前也有利用吸附過柱的方法提取DNA的商業化試劑盒。
[编辑] DNA的檢測
二苯胺(DPA)指示劑能夠證明DNA的存在。在酸中加熱後，含有脫氧糖的DNA水解，2-脫氧核糖轉變為ω-羥基菊芋糖醛(ω-hydroxylevulinyl aldehyde)，與二苯胺反應，產生藍色的化合物。DNA濃度可以利用分光光度計通過測量溶液在600nm的吸光度來計算。
測量DNA純度的方法是測量DNA溶液在260和280nm的吸光度。DNA吸收260nm處的紫外光，而蛋白質吸收280nm處的。一個較純的DNA樣品應該基本不含蛋白質，因此260/280的吸光度比值應該較高。
DNA也可以通過内切核酸酶切開後跑膠，與已知濃度的DNA分子量標準(marker或者ladder)對照來測定濃度。
[编辑] DNA的使用
提取得到的基因組DNA包含細胞核和線粒體DNA（真核生物）以及葉綠體DNA（植物和藻類）。這些DNA可用於法醫學鑑定、診斷和系統發育研究，以及用於進一步的聚合酶鏈式反應(PCR)以獲得DNA中的特殊信息。
純化得到的DNA也可用於研究DNA結構和化學性質，檢驗DNA-蛋白質相互作用，進行南方墨點法雜交，克隆和測序。
